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4. Verificação da Fertilização
A verificação da fertilização é feita entre 16-18 horas após a ICSI, através do microscópio invertido em aumento de 400X. É verificada a presença de prónucleos e corpúsculos polares e presença de anormalidades na fertilização ( ausência de prónucleos, mais de dois prónucleos, degenerações, etc.)
A fertilização é considerada normal quando dois prónucleos forem visualizados , contendo nucléolos em seu interior. Se apenas um prónucleo for visualizado, uma segunda avaliação é feita após 4 horas. Quando for detectada a presença de três ou mais prónucleos (PN), esse embrião é imediatamente descartado.
Os oócitos fertilizados são lavados em meio G1.2 e agrupados de 2 em 2 em placas de Petri sem centro com gotas de 50ml de meio G1.2 e cobertas com óleo mineral. As placas são colocadas novamente na incubadora e permanecem nesse mesmo meio de cultura até 72 horas após o ICSI ( Dia 3 ). Não é necessário o acesso aos embriões em 48 horas, evitando a abertura constante da incubadora que pode prejudicar a cultura dos mesmos.
Caso a transferência seja realizada no dia 3 ( 72 horas ), os embriões deverão permanecer em meio de cultura IVF 50 até 48 horas e deverá ser feita a renovação do mesmo meio após esse período até 72 horas. |